在光度法鱟試劑（LAL）檢測系統(tǒng)中，各類儀器配備的數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計運算功能表面趨同，但算法差異可能導致結論偏差，因此，使用者必須深入理解鱟試劑檢測軟件中統(tǒng)計學參數(shù)的計算方式，避免因算法差異導致結果誤判。

一、相關系數(shù)：衡量線性關系的關鍵指標

相關系數(shù)r表示兩個隨機變量（在光度LAL測試中，通常是內毒素濃度與起始時間或吸光度OD）之間線性關系的強弱與方向。美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）指南明確規(guī)定：“在內毒素濃度范圍內，相關系數(shù)| r |的絕對值必須大于或等于0.980。"

其計算r的公式如下：

相關系數(shù)的計算基于回歸分析，主要檢驗平均值與實際Y值之間的關系。在實際應用中，不同軟件計算相關系數(shù)的方式存在差異。部分軟件會利用起始時間的每個重復樣本進行計算；而另一些軟件則先計算重復數(shù)據(jù)的平均值，再對平均值進行回歸分析。后一種方法通過減少Y值（如起始時間對數(shù)）與最佳擬合線之間的偏差，進而得到比使用單個重復樣本更高的r值。

Pyros Kinetix® Flex細菌內毒素定量檢測系統(tǒng)

?三種型號：32孔 / 64孔 / 96孔

?雙重檢測波長：405nm和660nm，適用于重組法/動態(tài)顯色法/動態(tài)濁度法細菌內毒素檢測

?權-威法規(guī)：符合USP、ChP、EP、JP國際權-威細菌內毒素檢測標準

?審計追蹤：嚴格遵循聯(lián)邦法規(guī)21CFR Part 11標準，微軟SQL數(shù)據(jù)庫，具備數(shù)據(jù)完整性，自動生成審計追蹤報告

?FDA認證：生成檢測報告可直接用于美國FDA認證申報

?節(jié)約試劑：鱟試劑使用量僅需50µL

?高靈敏度：靈敏度可達0.001EU/mL，實際可達0.0005EU/mL

?溫控精準：37℃±0.1℃

但科德角國際合作企業(yè)美國ACC公司（Associates of Cape Cod）生產(chǎn)的所有軟件均采用前者方法，該方法能更保守地評估數(shù)據(jù)的線性度，并主張相關系數(shù)的計算應當結合重復樣本的變異性情況。FDA在1991年的動力學LAL技術指南中亦明確要求：“在計算每個標準品的重復樣品的反應時間之前，請勿求其平均值。"

二、變異系數(shù)：反映數(shù)據(jù)離散程度的相對指標

變異系數(shù)（Coefficient of Variation，簡稱CV）?是衡量數(shù)據(jù)離散程度的相對指標，它通過標準差與平均值的比值來定義，通常以百分比形式呈現(xiàn)。標準差（Standard Deviation）是統(tǒng)計學中的關鍵指標，用于反映數(shù)據(jù)的離散程度，體現(xiàn)每個數(shù)據(jù)點與平均值之間的偏離情況。當所有數(shù)據(jù)點都緊密圍繞平均值時，標準差（即CV）較小，趨近于零；反之，若數(shù)據(jù)點與平均值的距離較大，則標準差較大，遠離零；當所有數(shù)據(jù)值完-全相同時，標準差為零。

在統(tǒng)計分析中，計算標準差有兩種情況。當對數(shù)據(jù)集合中的每個數(shù)值都進行參數(shù)測量時，可以計算總體標準差，它能夠真實反映總體數(shù)據(jù)的離散程度（變異性），計算公式如下：

其中，∑表示求和操作，Xi表示每個數(shù)據(jù)點，N是數(shù)據(jù)總量。

另一種情況是從總體中抽取一定數(shù)量的樣本（n），通過以下公式估算總體標準差：

在此公式中，除數(shù)采用“n-1"，“-1"的作用是進行校正，以彌補樣本可能未能捕捉到的額外變異性。

在LAL檢測中，當重復樣本數(shù)量有限-時，應采用樣本標準差公式（分母為n-1），這種校正方式會適度放大CV值，進而得到更為保守的CV值，且“-1"對少量重復樣本的影響尤為顯著。例如，科德角國際的Pyros Kinetix® Flex細菌內毒素檢測系統(tǒng)中的Pyros® eXpress軟件即采用此方法。值得注意的是，部分軟件可能會使用計算總體標準差的公式（分母為N），將導致CV值被低估，但這并不意味著該方法的檢測精度更高，僅僅是數(shù)據(jù)處理方式不同所致。

CV的應用需嚴格對應檢測目標參數(shù)。在終點法檢測中，內毒素濃度與OD值呈正比，二者具有線性關系，此時OD值的CV值與內毒素濃度的CV值相等。但在動力學檢測中，起始時間需經(jīng)對數(shù)轉換后建立標準曲線以確定內毒素濃度，因此，起始時間的CV值始終小于內毒素濃度的CV值，若以起始時間CV評估重復性，可能因兩者非線性關系而產(chǎn)生誤導。因此，CV計算必須基于內毒素濃度均值，而非起始時間。

三、總結：明晰計算邏輯，確保檢測準確

深入了解軟件的計算方式，并確保正確應用相應公式至關重要。同時，合理設置規(guī)格標準也不容忽視。若軟件采用樣本標準差公式，而實驗室沿用基于總體標準差設定的CV標準，將導致合規(guī)性誤判。唯有明晰數(shù)據(jù)處理路徑，才能準確解讀結果并科學設定檢測可接受標準