從事細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)（BET）的技術(shù)人員在日常工作中，肩負(fù)著為多樣化產(chǎn)品設(shè)定精確內(nèi)毒素限值的重要任務(wù)。他們不僅需根據(jù)每種產(chǎn)品的特性定制專屬檢測(cè)方法，還需確保這些方法的驗(yàn)證過程嚴(yán)謹(jǐn)無(wú)誤，最終順利交接給質(zhì)量控制部門。

那么，究竟什么是內(nèi)毒素限值？為了準(zhǔn)確計(jì)算這一關(guān)鍵指標(biāo)，技術(shù)人員需要了解哪些信息才能計(jì)算出內(nèi)毒素限值？

一、內(nèi)毒素限值的定義與重要性

內(nèi)毒素限值，簡(jiǎn)而言之，是指在產(chǎn)品中允許存在的內(nèi)毒素最大濃度閾值，這一數(shù)值的設(shè)定旨在評(píng)估內(nèi)毒素（作為革蘭氏陰性細(xì)菌外膜外層的成分）在注射到哺乳動(dòng)物體內(nèi)后引發(fā)不良反應(yīng)，特別是發(fā)熱癥狀。由于革蘭氏陰性細(xì)菌在自然界中普遍存在，因此大多數(shù)原材料和腸外產(chǎn)品中可能都存在一定程度的內(nèi)毒素。為此，藥典BET標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)產(chǎn)品特異性、劑量依賴性、給藥途徑和給藥時(shí)間依賴性的考量，精確計(jì)算出內(nèi)毒素限值，以此作為衡量并控制產(chǎn)品中保留的內(nèi)毒素水平的關(guān)鍵指標(biāo)，從而全面評(píng)估藥品的安全性。

二、內(nèi)毒素限值的計(jì)算方法

計(jì)算內(nèi)毒素限值通常采用公式K/M，其中K為內(nèi)毒素閾值劑量，M為人用每千克體重每小時(shí)的最大供試品劑量。

在細(xì)菌內(nèi)毒素限值公式中，K值作為分子部分，即內(nèi)毒素閾值劑量（TPD），是一個(gè)至關(guān)重要的常數(shù)。它代表了通過統(tǒng)計(jì)評(píng)估得出的、能夠誘發(fā)兔子發(fā)熱反應(yīng)所需的內(nèi)毒素活性水平的臨界值。

很多人，甚至一些現(xiàn)行的指導(dǎo)文件都混淆了這一點(diǎn)，認(rèn)為“K"就是內(nèi)毒素限值。然而，“K"只是其中的一部分……

總的來說，K值取決于給藥途徑。對(duì)于靜脈注射（IV）或肌肉注射（IM）產(chǎn)品，K=5EU/（kg·h）；對(duì)于鞘內(nèi)給藥（IT）產(chǎn)品，K值顯著降低至0.2EU/（kg·h）。對(duì)于放射性藥物，則非鞘內(nèi)給藥途徑的K=175EU，鞘內(nèi)給藥途徑的K=14EU。

M =ml /（kg·h）

M =mg /（kg·h）

M =U/（kg·h）

內(nèi)毒素限值公式中的分母 “M "為人用每千克體重每小時(shí)的最大供試品劑量，其計(jì)算需考慮目標(biāo)患者群體的體重、給藥劑量及給藥時(shí)間。對(duì)于不同患者群體（如成人、兒童或不同動(dòng)物種類），M值需進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。

例如：在兒科用藥中，某一藥品的劑量以ml/（kg·h）為單位進(jìn)行標(biāo)示，我們可將其定義為M，作為參考基準(zhǔn)。當(dāng)藥品為獸藥且適用于多種動(dòng)物時(shí)，則ml/（kg·h）通常是給予最小動(dòng)物的最高劑量。這雖是基于經(jīng)驗(yàn)總結(jié)的通用原則，但仍需通過計(jì)算代表目標(biāo)患者群體極-端情況的多個(gè)實(shí)例的ml /（kg·h）來確認(rèn)內(nèi)毒素限值，以確保用藥的安全性與有效性。

三、計(jì)算內(nèi)毒素限值需了解的信息

為了準(zhǔn)確計(jì)算內(nèi)毒素限值，技術(shù)人員需要掌握以下關(guān)鍵信息：

給藥途徑：了解產(chǎn)品的給藥方式，以確定適用的K值。如；靜脈注射（IV）或肌肉注射（IM）給藥，K=5EU/kg，鞘內(nèi)給藥K=0.2 EU/kg。

確定每公斤患者的劑量：若劑量最初是以“全人"（即成人平均體重）為基礎(chǔ)設(shè)定的，則必須用劑量除以目標(biāo)人群的體重來調(diào)整劑量，以計(jì)算出劑量/kg的具體值。如果某一藥物的整體劑量適用于成人和兒童，那么兒童劑量/（kg·h）將高于成人劑量/（kg·h）。

每小時(shí)的劑量：在計(jì)算藥物劑量時(shí)，若總劑量是通過持續(xù)“n"小時(shí)的輸注方式給予，那么為了確定每小時(shí)的給藥量，則必須通過將總劑量除以給藥時(shí)間來調(diào)整，以獲得每小時(shí)的劑量。

對(duì)于任何給藥途徑，內(nèi)毒素限值都與劑量成反比。劑量越低，每單位劑量的限值就越高。如 ：

如果劑量為1 mg/（kg·h），則內(nèi)毒素限值為5 EU/（kg·h）÷1 mg/（kg·h）=5 EU/mg

如果劑量為10 mg/（kg·h），則內(nèi)毒素限值為5 EU/（kg·h）÷10 mg/（kg·h）=0.5 EU/mg

如果劑量為100mg/（kg·h），內(nèi)毒素限值為5 EU/（kg·h）÷100 mg/（kg·h）=0.05 EU/mg

確定一種產(chǎn)品的最-低內(nèi)毒素限值是一個(gè)綜合性的評(píng)估過程，因?yàn)樗赡芤虿煌慕o藥途徑、劑量/kg（每公斤體重劑量）以及劑量/h（每小時(shí)劑量）而有所變化。為了精確找到任何給定制劑的最-低內(nèi)毒素限值，必須全面考慮實(shí)驗(yàn)室提供的數(shù)據(jù)及包裝說明書中的詳細(xì)說明，將所有這些因素綜合起來進(jìn)行計(jì)算分析。這一過程確保了最終確定的內(nèi)毒素限值能夠全面反映產(chǎn)品在不同使用條件下的安全性要求。

四、結(jié)論

內(nèi)毒素限值的計(jì)算與檢測(cè)方法的開發(fā)是確保藥品安全性的重要環(huán)節(jié)。通過科學(xué)合理地設(shè)定內(nèi)毒素限值，并開發(fā)靈敏可靠的檢測(cè)方法，可以有效降低藥品中內(nèi)毒素含量對(duì)患者健康的潛在威脅。因此，在醫(yī)藥研發(fā)和生產(chǎn)過程中，應(yīng)高度重視內(nèi)毒素檢測(cè)工作，并不斷完善相關(guān)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)體系。